對(duì)熒光素酶檢測(cè)試劑盒的知識(shí)點(diǎn)不要不懂裝懂
瀏覽次數(shù)：1148發(fā)布日期：2020-12-03
熒光素酶檢測(cè)試劑盒使用為基因表達(dá)的定量研究提供了一種方便、快捷、靈敏的方法。利用轉(zhuǎn)錄調(diào)控和熒光素酶報(bào)告基因耦聯(lián)表達(dá),常被用于研究培養(yǎng)細(xì)胞的多種生物學(xué)特性。熒光素酶是理想的報(bào)告基因，因?yàn)椴溉閯?dòng)物細(xì)胞中不含內(nèi)源性熒光素酶，一旦轉(zhuǎn)錄完成立即生成功能性的熒光素酶。
熒光素酶檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):
*裂解能力更強(qiáng)：能夠*裂解絕大部分種類(lèi)細(xì)胞。
*信號(hào)更強(qiáng)：能夠準(zhǔn)確檢測(cè)弱啟動(dòng)子的表達(dá)。
*靈敏度更高：可檢測(cè)低至10‐20摩爾熒光素酶分子。
*線(xiàn)性范圍更廣：線(xiàn)性檢測(cè)范圍超過(guò)酶濃度的8個(gè)數(shù)量級(jí)。
熒光素酶檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：
1、樣品和測(cè)定試劑混合后到測(cè)定前的時(shí)間應(yīng)盡量控制在相同時(shí)間內(nèi)，例如30秒內(nèi)。
2、測(cè)定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測(cè)定，以減少溫度對(duì)酶反應(yīng)有影響。
3、建議適當(dāng)分裝后避光保存，避免反復(fù)凍融和長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫。三次以?xún)?nèi)的凍融對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯影響。
4、樣品和測(cè)定試劑混合后，必須等待1-2秒，再進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定時(shí)間通常為10秒，根據(jù)情況也可以測(cè)定更長(zhǎng)或更短時(shí)間，但是同一批樣品較好使用相同的測(cè)定時(shí)間。
熒光素酶檢測(cè)試劑盒基于兩個(gè)發(fā)光報(bào)告基因分析系統(tǒng)來(lái)定量檢測(cè)基因表達(dá)。兩個(gè)不同的熒光素酶，螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶，在細(xì)胞中同時(shí)表達(dá)，從而在同一樣品中實(shí)現(xiàn)有效的雙報(bào)告分析。
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