人肺MatchPair™:肺上皮細胞和腫瘤原代細胞

培養步驟:
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞分類：

一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源，保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產品： 

0.094ng/ml人游離脂肪(FFA)ELISA試盒pUNO1-mMSK2

28.125pg/ml人游離原卟啉(FEP)ELISA試盒 pUNO1-mMUL1a

0.281ng/ml人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)ELISA試盒pUNO1-mMYCb

0.281ng/ml人趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試盒pUNO1-mMYD88

0.188ng/ml人卵泡抑素(FS)ELISA試盒pUNO1-mMYT1Lb

18.75pg/ml人促卵泡素(FSH)ELISA試盒pUNO1-mNAIP1

0.375ng/ml人葉(FA)ELISA試盒pUNO1-mNAIP5

9.375pg/ml人黏著斑激酶(FAK)ELISA試盒pUNO1-mNALP10

0.094ng/ml人FMS樣酪氨激酶3(Flt3)ELISA試盒pUNO1-mNALP2

18.75pg/ml人FMS樣酪氨激酶3配體(Flt-3L)ELISA試盒pUNO1-mNALP3
人肺MatchPair™:肺上皮細胞和腫瘤原代細胞半胱氨豐富分泌蛋白3(CRISP3)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)2,5-雙(5-叔基-2-苯并惡唑基)噻吩(>98.0%(HPLC)(N))

2',5'-寡腺苷合成酶2(OAS2)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)4,4-雙(5-基-2-苯并惡唑基)二苯烯(>98.0%(N))

2',5'-寡腺苷合成酶3(OAS3)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)2-(4-叔苯基)-5-(4-聯苯基)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC))

降鈣素原(PCT)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)1,1-雙[4-[N,N-二(對苯)氨基]苯基]環己(>98.0%(N))

白介素10受體α(IL10Rα)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)3-(2-苯并噻唑基)-7-(二氨基)香豆素(>98.0%(HPLC)(T))

死亡關聯蛋白激酶1(DAPK1)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法) 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二氨基)香豆素(>98.0%(T))

成纖維細胞激活蛋白α(FAPα)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)4,4'-雙[二(3,5-二苯基)氨基]-4''-苯基三苯胺(>98.0%(HPLC))

二酰甘油-O-酰基轉移酶同源物1(DGAT1)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)4,4'-雙[N-(1-萘基)-N-苯氨基]-4''-苯基三苯胺(>98.0%(HPLC))

大腸桿菌宿主殘留蛋白(ECP)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)4,4'-雙(5-基-2-苯并惡唑基)芪(升華提純)(>96.0%(HPLC))

纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)2-(4-叔苯基)-5-(4-聯苯基)-1,3,4-惡二唑(升華提純)(>99.0%(GC))

剪切修復交叉互補修復缺陷偶聯因子1(ERCC1)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)4,4'-雙(9H-咔唑-9-基)聯苯(>98.0%(HPLC)(N))

死亡關聯蛋白激酶3(DAPK3)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)2,5-二(5-叔基-2-苯并惡唑基)噻吩 (升華提純)(>99.0%(HPLC)(N))

核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)暈苯(>95.0%(GC))

S100鈣結合蛋白A2(S100A2)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)暈苯(升華提純)(>98.0%(GC))

管緊張素1-7(Ang1-7)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)心環烯(>97.0%(GC))